5.6結(jié)論
上述3次HBsAg病毒抗原性破壞的試驗(yàn)證明,經(jīng)WXP整理后的織物(毛巾),作用8h,S/N值分別為1.74、1.50和2.06,S/N值均小于2.1,為陰性。
6 WXP整理劑(乳液)滅活SARS病毒試驗(yàn)
6.1殘留整理劑化學(xué)中和劑篩選及對正常細(xì)胞的影響試驗(yàn)
6.1.1材料
(1)試樣:WXP抗病毒紡織品整理劑(以下簡稱WXP乳液),有效濃度20%。
(2)中和劑:1%吐溫80+0.3%卵磷脂+1%甘氨酸。
(3)病毒:SARS病毒(2OTCID5O/mL)。
(4)宿主細(xì)胞:Vero E6。
6.1.2方法
根據(jù)衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版中2.2.2.10.5的技術(shù)規(guī)范設(shè)計(jì)試驗(yàn),采用細(xì)胞毒試驗(yàn)(MTT法)評估中和劑、消毒劑和中和產(chǎn)物的細(xì)胞毒性,以殘留病毒引起細(xì)胞病變的百分率來評估病毒滅活作用。
在進(jìn)行預(yù)備試驗(yàn)之前:①測試中和劑100、10-1、10-2、10-3、10-4。稀釋液的細(xì)胞毒性;②測試WXP整理劑(乳液)100、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8稀釋對細(xì)胞的毒性。
(1)預(yù)備試驗(yàn)
第1組測試10-2稀釋中和劑的細(xì)胞毒性;
第2組測試”10-2稀釋的中和劑+10-2稀釋的WXP整理劑(乳液)”產(chǎn)生的中和產(chǎn)物的細(xì)胞毒性;
第3組測試10-2稀釋的WXP整理劑(乳液)的細(xì)胞毒性。
試驗(yàn)體系作用時(shí)間為3h,觀察時(shí)間3d。
(2)正式試驗(yàn)
第1組受試的WXP整理劑(乳液)為10-2稀釋液+病毒,以無離子水代替中和劑,作用溫度2O℃,時(shí)間2Omin;
第2組用10-2稀釋的中和劑,其它條件相同;
第3組用無離子水代替WXP整理劑(乳液),其它條件相同;
第4組用中和產(chǎn)物加病毒液,其它條件相同;
第5組用無離子水加病毒,其它條件相同;
第6組為正常細(xì)胞對照。
第1-5組經(jīng)作用后,連續(xù)稀釋,測定病毒濃度。
6.1.3結(jié)果
WXP整理劑(乳液)細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果見表4、表5。其中,殘留WXP整理劑(乳液)中和劑篩選試驗(yàn)的預(yù)試驗(yàn)結(jié)果見表4,正式試驗(yàn)結(jié)果見表5。
結(jié)果分析:100、10-1中和劑對受試細(xì)胞有毒性,不能用于中和試驗(yàn)。因此,選擇10-2稀釋中和劑用于中和試驗(yàn)。
結(jié)果分析:WXP整理劑(乳液)稀澤10-7后對細(xì)胞仍有毒性,因此不能直接用于SARS病毒滅活后接種Vero E6細(xì)胞的試驗(yàn);但選擇10-2稀釋中和劑中和后,仍可降低細(xì)胞毒性。
表4中和劑對veroE6細(xì)胞的細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果
表5 WXP試樣對Vero E6細(xì)胞的細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果
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